流式细胞仪型号有FACSCanto II、FACSVerse、FACSAria、CytoFLEX、MoFlo XDP等等。流式细胞仪(Flow cytometer)是对细胞进行自动分析和分选的装置。它可以快速测量、存贮、显示悬浮在液体中的分散细胞的一系列重要的生物物理、生物化学方面的特征参量,并可以根据预选的参量范围把指定的细胞亚群从中分选出来。
在选择流式细胞仪时,您可能会面临众多品牌和型号的抉择。让我们深入探讨一下,究竟哪一款最适合您的实验室需求:过去,您的实验室曾使用过Aria 2和Aria 3这样的高端流式细胞仪,如BD的FACS Aria系列,进行肿瘤细胞GFP的单克隆分选工作。
目前贝克曼库尔特公司的流式细胞仪包括:临床型流式细胞仪、科研型流式细胞仪、细胞分选仪等;具体型号包括:CytoFLEX系列和MoFlo系列。
有几个办法。一是用流式本身自带的分析软件,输出为图表的格式。二是直接把流式实验的原始数据从硬盘上直接拷贝,将来还是用分析软件打开,也可以用Excel打开,自行生成图表。
市面上绝大多数的流式细胞仪都是以FCS文件格式保存数据的。以BD的机器为例,所使用的 DIVA软件,可以在右侧的列表中的每个实验,或者每个样本的上点右键,然后选中export,再选中export data,然后制定路径就可以导出了。导出的数据可以使用任何可读取FCS文件的软件来读取分析。
当然能导出了。有几个方法。如果你用的是BD的Diva软件,在记录所有数据后。在Experiment栏目上点右键,会有一个batch analysis的选项。点击后,会有几个结果输出选项,包括PDF打印。统计数据输出等等。你可以根据需要选择,并指定文件路径。就可以得到数据了。
使用流式细胞仪采集所需的细胞数据。流式细胞仪软件中导出原始数据文件。使用适当的数据处理软件,如FlowJo、FCSExpress等,打开导出的数据文件,使用平滑算法对数据进行平滑处理,以生成平滑的曲线。
(一)单参数直方图 单参数直方图是一维数据用得最多的图形显示形式,既可用于定性分析,又可用于定量分析,形同一般X-Y平面描图仪给出的曲线。根据选择放大器类型不同,横坐标可以是线性标度或对数标度。用信道来表示,实质上是所测的荧光或散射光的强度。
在流式细胞仪的分析中,CV(Coefficient of Variation)是一个重要的指标,它源自统计学,与标准差有着密切的联系。简单来说,CV是衡量一组数据变异程度的相对量,其数值大小反映了数据分布的集中度。
流式细胞仪的核心在于它的三大组件:液路系统、光路系统以及电子系统。液路系统如精密的舞者,通过鞘液的压力,让单个细胞在管路中形成精准的单列移动,确保了数据的精确性和一致性,如图1所示。
如何分析流式细胞仪检测t淋巴细胞亚群结果 称为“胸腺依赖性淋巴细胞”胸腺衍生的淋巴细胞,简称为“T细胞”是鸟类和哺乳动物由胸腺衍生的淋巴细胞。分布于胸腺依赖性区外周淋巴组织,并通过淋巴,血液和组织液再循环。为约70%在血液淋巴细胞,更长的寿命帐户。参与细胞的免疫反应,也可能会影响体液免疫。
最常见的是分析CD4, CD8亚群。先在FSC, SSC散点图上划出淋巴细胞gate。然后在此gate基础上选取T细胞标志染色阳性的细胞群(一般是CD3)。在把CD34阳性的细胞根据CD4 和CD8染色情况形式为散点图,得到CD4+/CD8-, CD4-/CD8+, 以及双阳性的比率。如果还有其他细胞标志的染色,再进一步分析。
先在FSC/SSC散点图gate出淋巴细胞;然后把淋巴细胞显示到柱状图,gate出CD3阳性的(T细胞);再把T细胞显示到散点图,横坐标,纵坐标分别为CD4和CD8。
第一步是在FSC, SSC散点图上根据细胞大小gate出淋巴细胞群。然后在gate出单细胞群。检测CD4和CD8,应该还要同时染色CD 先选中CD3阳性的细胞(T细胞),然后把T细胞在CD4/CD8的散点图上再显示,可以分为四个象限。分别代表CD4阳性,CD8阳性,双阳性,和无染色的。
1、据百度介绍赛多利斯iQue高通量流式细胞仪和传统流式有所区别。首先其采样方式是专利的”气泡间隔“法,可连接任意自动化系统,实现连续孔板上样。另外一个特点是可以对同一孔中的样品同时进行免疫表型、细胞健康和细胞因子分析。所以检测速度非常快。基本上5分钟就可以完成96孔板检测。
2、据百度介绍赛多利斯的产品性价比还是很高,iQue是比较特点的流式细胞仪。可在同一时间点对悬浮样本中的细胞、微球和分泌蛋白进行高内涵、多重分析。
3、赛多利斯这个品牌你可以了解下,其研发的iQue 3流式细胞仪适用于基于细胞和微球筛选的试剂盒能够实现多种细胞表征及分析,包括细胞周期、细胞凋亡、细胞膜完整性、细胞增殖和抗体表征,还能测定微球和/或细胞上的多种免疫细胞功能,同时评估表型和功能。
4、德国品牌赛多利斯不错的 ,他们的流式细胞仪iQue采用气泡分隔的连续采样技术,真正实现了高通量。
有很多网站有FCS的样本文件可以下载 比如 FlowRepository 还有杜克大学流式细胞仪的数据库 百度不许贴链接,你可以Google搜一下关键词fcs sample file。免费的软件也有不少,你也可以同样搜一下。
打开NovoExpress,导入FCS文件即可。首先打开NovoExpress,导入一个模板为新的实验文件,然后创建一个与所选择实验文件相同模板的新文件。其次导入选择的FCS文件到当前标本,最后按照选择文件夹的层次结构导入文件夹下所有的FCS文件。
市面上绝大多数的流式细胞仪都是以FCS文件格式保存数据的。以BD的机器为例,所使用的 DIVA软件,可以在右侧的列表中的每个实验,或者每个样本的上点右键,然后选中export,再选中export data,然后制定路径就可以导出了。
可以。流式细胞仪都是fcs格式的文件,很多软件都可以读。但是FlowJo,Metlab是需要收费开的。其他的都是免费的。